定氮儀是根據(jù)蛋白質(zhì)中氮的含量恒定的原理,通過(guò)測(cè)定樣品中氮的含量從而計(jì)算蛋白質(zhì)含量的儀器。是檢測(cè)種子、乳制品、飲料、飼料、土壤及其他農(nóng)副產(chǎn)品中氮含量的 儀器。
定氮儀常用的有兩種:凱氏定氮儀和杜馬斯定氮儀,這二者的原理是不同的。
凱氏定氮法是測(cè)定化合物或混合物中總氮量的一種方法。即在有催化劑的條件下,用濃硫酸硝化樣品將有機(jī)氮都轉(zhuǎn)變成無(wú)機(jī)銨鹽,然后在堿性條件下將銨鹽轉(zhuǎn)化為氨,隨水蒸氣餾出并為過(guò)量的酸液吸收,再以標(biāo)準(zhǔn)酸滴定,就可計(jì)算出樣品中的氮量。由于蛋白質(zhì)含氮量比較恒定,可由其氮量計(jì)算蛋白質(zhì)含量,故此法是經(jīng)典的蛋白質(zhì)定量方法。
杜馬斯燃燒的方法是將一定量的樣品封裝在鋁舟中,然后在高溫爐中進(jìn)行燃燒;在催化劑和氧氣的環(huán)境中,樣品燃燒后生成的氣體為:CO2、H2O、NOx;這些氣體再經(jīng)過(guò)還原爐后,NOx被還原為N2,而CO2和H2O分離開(kāi);后氮元素被熱傳導(dǎo)檢測(cè)器(TCD)來(lái)測(cè)量出含量。全部測(cè)量過(guò)程在3分鐘內(nèi)完成。
除此之外,兩者的適用范圍也有所不同
凱氏定氮法通過(guò)硫酸高溫消化,只能將有機(jī)氮轉(zhuǎn)化為無(wú)機(jī)銨,而對(duì)于硝態(tài)氮(如硝酸鹽、亞硝酸鹽)則不能轉(zhuǎn)化。因此凱氏定氮法適用于不含硝態(tài)氮的食品、農(nóng)產(chǎn)品、化妝品、醫(yī)藥等。
杜馬斯燃燒法既能將有機(jī)氮轉(zhuǎn)化為N2,又能將無(wú)機(jī)的硝態(tài)氮轉(zhuǎn)化為N2。因此,杜馬斯的應(yīng)用更為廣泛。